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3D细胞培养模型之移液优化方案

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浏览:- 发布日期:2023-02-01 11:10:34【

由于3D模型可以更准确地模拟真实组织或肿瘤中的细胞行为,在癌症研究等许多研究领域,对3D模型的研究兴趣正在不断增加。构建3D细胞培养模型比建立2D模型更具有挑战性,通常需要试验多种基质和技术,才能获得佳结果。

本研究重点放在利用微丝组装来模拟体内环境中的细胞外基质,以创建用于生物医学应用的功能性组织,目前正在开发一种体外乳腺癌模型,用于评估候选药物并作为生物医学研究的创新系统。

Q与其他 3D 基质相比,Biosilk™ 的主要优势是什么?

Biosilk™ 的主要优势在于细胞具有高度增殖性,对比封装于水凝胶中的细胞,可更有效地进行扩散。此外,Biosilk™ 可用于获得各种不同的支架,例如泡沫、膜和纤维。这些支架也可以相互组合,从而创建共培养系统。

初步研究结果表明,与2D培养相比,在3D Biosilk™ 中培养的相同类型细胞表现出更高的侵袭性标记。

Q 96孔板形式的 3D Biosilk™ 乳腺癌模型的详细描述

目标是获得3D模型,其中乳腺癌细胞生长嵌入Biosilk™ 泡沫。每个泡沫(厚度约130 μm,直径约700 μm) 培养在96孔板的孔中作为浮动3D构建体培养(见图1)。将Biosilk™ 泡沫培养一周,用于药物试验、增殖分析、基因表达水平测量和免疫荧光

目前,这一方法的主要局限是通量低,造成这一问题的原因在于创建每个泡沫需要:A. 使用单通道手动移液器(赛多利斯Mline® 移液器);B. 创建在聚四氟乙烯(Teflon)表面上,然后分离 Biosilk™ 泡沫,并转移至96孔板。

目前,大家正在优化发泡方案以实现高通量。在该研究方向上,我正在将3D Biosilk™ 浮动形式与“半3D形式”进行比较,后者是指将泡沫直接超低附着于96孔板,并保持附着在底部。请参阅表 1 中有关增加通量的详细工作流程。这种格式也可与使用多通道电动移液器(例如赛多利斯Picus® Nxt 移液器)添加的细胞培养基兼容。下一步,大家将评估使用8通道Tacta® 移液器在半3D形式中直接将泡沫附着于96孔板;这似乎是非常有潜力的一种选择,既可以增加通量,又可满足大家快速混合的需求。

电动移液器

Q您测试赛多利斯Picus® Nxt 电动移液器的主要动机是什么?

主要原因是尝试采用一种新的、更高通量的方案,形成3DBiosilk™ 泡沫。与之前的方案相比,新方案的重要变化表现为:(1)使用Picus® Nxt 移液器(8通道,5–120μL)同时对8个。Biosilk™ 泡沫进行发泡处理;(2)发泡操作直接在96孔板中完成。

Q您在使用赛多利斯Picus® Nxt 电动移液器时是否遇到任何问题或困难?

移液器速度可能稍微有点低,无法产生类似于手动控制移液器所获得的泡沫。这样一来,3D结构中的气泡更大,从而导致终的Biosilk™ 泡沫整体稳定性较差。Picus® Nxt 移液器的增加速度选项设置可使得产生的气泡更小,由此使Biosilk™ 泡沫更稳定。

您对赛多利斯Picus® Nxt 电动移液器有何看法?

Picus® Nxt 移液器编程直观,重要的是,它在3D Biosilk™ 泡沫产品的规模化生产方面显示出了巨大潜力。目前,Biosilk™ 泡沫的手动起泡大约需要15秒。而一支8通道移液器将使大家的速度提高八倍。这将提高细胞存活率和操作员的人体工程学条件。

文章转自:公众号 赛多利斯实验室